二氧化碳培養(yǎng)箱的應(yīng)用及維護

二氧化碳培養(yǎng)箱的應(yīng)用及維護

    說到二氧化碳培養(yǎng)箱大家可能對它的名字比較熟知，但對它的真正了解可能不是太多，前面我們也提到過它的兩種常見的工作形式，今天我們主要說說它的應(yīng)用范圍及一些維護技巧。

二氧化碳培養(yǎng)箱主要是通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個類似細胞/組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境，如穩(wěn)定的溫度（37°C）、穩(wěn)定的CO2水平（5%）、恒定的酸堿度（pH值：7.2-7.4）、較高的相對飽和濕度（95%），來對細胞/組織進行體外培養(yǎng)的一種裝置。因為它這樣*的特性使它廣泛應(yīng)用于細胞、組織培養(yǎng)和某些特殊微生物的培養(yǎng)，常見于細胞動力學(xué)研究、哺乳動物細胞分泌物的收集、各種物理、化學(xué)因素的致癌或毒理效應(yīng)、抗原的研究和生產(chǎn)、培養(yǎng)雜交瘤細胞生產(chǎn)抗體、體外授精（IVF）、干細胞、組織工程、藥物篩選等研究領(lǐng)域。其原理是應(yīng)用人工的方法在培養(yǎng)箱內(nèi)造成微生物和細胞、細菌、病毒生長繁殖的人工環(huán)境，如控制一定的溫度、濕度、氣體等，主要用于組織培養(yǎng)和一些特殊微生物的培養(yǎng)。

正因為它是培養(yǎng)細胞和細菌的設(shè)備，那么對于細胞來說，非常理想的培養(yǎng)環(huán)境同樣也適合這些污染物的生存，培養(yǎng)箱本身是不會辨別的，而細胞培養(yǎng)中大部分時間里細胞都是位于培養(yǎng)箱內(nèi)。

如病毒：由于病毒寄生生存，爆發(fā)后盡快和正常細胞隔離，丟棄處理，相對來說容易處理，對操作者威脅較大;盡管病毒污染的細胞不影響原代培養(yǎng)，但生產(chǎn)疫苗是不安全的。因此，潛在病毒是細胞大量生產(chǎn)和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題。

支原體：支原體污染后，因為它們不會使細胞死亡可以與細胞長期共存，培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁，細胞無明顯變化，外觀上給人以正常感覺，實則細胞已經(jīng)受到多方面潛在影響，如引起細胞變形，影響DNA合成，抑制細胞生長等，往往被大多數(shù)實驗者忽視。

細菌：細菌污染后，培養(yǎng)基1-2天就會變色，對細胞生長影響明顯，應(yīng)迅速將污染細胞與其它細胞系隔離，滅菌后丟棄，還要用實驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺。

     真菌（霉菌和酵母菌）：真菌生長的比較慢，不象細菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細胞就被污染了;目前沒有好的抑制方法，包括現(xiàn)在常用的兩性霉素，一旦污染容易反復(fù)爆發(fā)，尤其孢子很難殺滅。

     所以對于二氧化碳培養(yǎng)箱而言，其培養(yǎng)細胞的本身對細胞、細菌的污染防治也是尤為重要的，否則我們的實驗將會產(chǎn)生適得其反的效果。